010-58222798
阴性细胞分选如何获得高纯度、高回收率的目标细胞？
2025-10-09 10:55
一、精确去除非目的细胞
01
精确识别非目标细胞，明确所有需要去除的细胞类型。
02
使用高特异性、高亲和力的抗体来识别非目标细胞。
03
使用针对不同非目标细胞表面标志物的混合抗体，确保尽可能全面地覆盖所有非目标细胞。
04
选择结合力强、尺寸均一的纳米磁珠，并确保磁力分选器的磁场强度足够强且均匀，可获得更高纯度的目的细胞。
阴选试剂盒推荐
IBEADSⓇ阴选试剂盒，针对非目标细胞的混合抗体配比合理，种类全面，精确识别去除非目的细胞，同时使用50nm磁珠,可获得高纯度、高回收率、高活性的细胞。
二、优化样本制备和处理过程
1、高质量的起始样本
NO.1
（1）使用新鲜、高活力的细胞样本。
（2）确保组织样本被充分解离成单细胞悬液，避免细胞结团。
（3）根据样本类型，可能需要去除粘附细胞或血小板，避免造成非特异性结合。
2、有效洗涤去除杂质
NO.2
在分选过程中使用足量、冰冷的、含蛋白质和EDTA的缓冲液彻底洗涤细胞，去除未结合的抗体、细胞碎片等杂质，这是减少非特异性结合的关键。
3、温和的细胞处理
NO.3
（1）始终在4°C环境下操作，以抑制细胞代谢和内吞作用，减少非特异性结合和细胞损失。
（2）使用预冷的缓冲液和离心机。
（3）避免剧烈涡旋或吹打。
（4）尽量减少操作步骤和时间。
4、细胞浓度控制
NO.4
遵循磁珠分选试剂盒推荐的最佳细胞浓度，浓度过高会导致细胞聚集、增加非特异性结合、分选柱堵塞；浓度过低则效率低下且回收率可能因吸附损失而降低。
三、优化分选过程
01
严格遵守操作流程，控制上样速度，避免过快导致结合不充分或细胞机械损伤，过慢则增加非特异性结合机会。
02
分选过程中，使用足量缓冲液洗涤分选柱，确保收集所有未结合的目标细胞，这是获得高纯度、高回收率的核心步骤。