Human CD4/8纳米分选磁珠-CAR-T细胞疗法的重要工具

免疫疗法是当下肿瘤治疗领域最具前景的发展方向之一。CAR-T（Chimeric antigen receptor T cell，嵌合抗原受体T细胞）免疫疗法，是指通过基因修饰技术，将带有特异性抗原识别结构域及T细胞激活信号的遗传物质转入T细胞，使T细胞直接与肿瘤细胞表面的特异性抗原相结合而被激活，通过释放穿孔素、颗粒酶素B等直接杀伤肿瘤细胞，同时还通过释放细胞因子募集人体内源性免疫细胞杀伤肿瘤细胞，从而达到治疗肿瘤的目的，而且还可形成免疫记忆T细胞，从而获得特异性的抗肿瘤长效机制。

CAR-T疗法通过基因工程改造患者自身T细胞，使其表达靶向肿瘤抗原的嵌合抗原受体。整个制备流程分为三大阶段：患者白细胞提取；T细胞的分离和制备；回输治疗。

其中T细胞分选在CAR-T细胞制备中非常重要，直接影响到CAR-T细胞的抗肿瘤活性。

T细胞磁珠分选的优点主要分为以下几点：

l   减少起始样本中杂细胞的污染，减小批次间差异

l   获得高纯度的T细胞，确保后续T细胞激活和培养的顺利进行

l   提高转染效率

因此可以通过CD4+和CD8+磁珠分选得到高纯度的T细胞，在进行后续激活培养和转染，保证CAR-T细胞产生更好的抗肿瘤效应。

Human CD4 Nano ibeads® kit 可以用于基于CD4抗原表达的人类细胞分离。CD4在胸腺和外周血的T辅助细胞上高度表达，也在单核细胞和树突状细胞上表达，但其水平低于CD4+ 辅助性T细胞。本产品由CD4单克隆抗体与50 nm磁珠偶联而成，从而实现 CD4阳性细胞的分选。

其原理是用人CD4 50 nm磁珠直接与人CD4+细胞结合后，将细胞与磁珠混合悬液放置在ibeads®分选磁极中的ibeads®小号或中号，或其他合适的分选柱中。磁分离后留在分选柱中被标记的细胞即为阳性分选的CD4+表达细胞，可进行后续的相关实验研究；也可收集分离的下清液，即为无CD4表达的阴性细胞。

将柱子从磁场中移开后，留在分选柱上被磁性标记的CD4+细胞作为阳性分选的细胞可以用缓冲液洗脱下来。

Human CD8 Nano ibeads® kit 可以用于基于CD8抗原表达的人类细胞分离。CD8在细胞毒性T细胞上强烈表达，并与T细胞受体相关，而在NK细胞亚群上微弱表达。本产品由CD8单克隆抗体与50 nm磁珠偶联而成，从而实现 CD8阳性细胞的分选。

其原理是CD8 50 nm磁珠直接与人CD8+细胞结合后，将细胞与磁珠混合悬液放置在ibeads®分选磁极中的ibeads®小号或中号，或其他合适的分选柱中。磁分离后留在分选柱中被标记的细胞即为阳性分选的CD8+表达细胞，可进行后续的相关实验研究；也可收集分离的下清液，即为无CD8表达的阴性细胞。

将柱子从磁场中移开后，留在分选柱上被磁性标记的CD8+细胞作为阳性分选的细胞可以用缓冲液洗脱下来。