CD14是一种白细胞表面的蛋白分子,主要分布在单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞的细胞表面,可作为区分单核细胞或巨噬细胞的标记物。此外,活化的中性粒细胞表面也存在少量CD14。
CD14蛋白主要存在两种形式
膜结合型CD14(mCD14)和可溶性CD14(sCD14)。
膜结合型CD14是一种55kDa的糖蛋白,通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚固于细胞膜。其蛋白质部分由包括356个氨基酸残基组成的多肽链和一个由19个氨基酸残基组成的末端多肽链构成,其中末端多肽为强疏水性多肽链。膜结合型CD14主要分布在单核细胞、巨噬细胞和树突细胞的细胞表面,被激活的中性粒细胞表面也有少量存在。能够结合并识别多种微生物配体,如革兰阴性菌的LPS(脂多糖)、分支杆菌的LAM(脂阿拉伯甘露聚糖)等,从而启动免疫反应。参与内毒素等物质的降解及解毒效应,通过内化活动激活细胞因子的表达,促进病原体的清除。
可溶性CD14的分子量约为48kDa,其蛋白质结构与:膜结合型CD14的蛋白质结构基本相同,但不含有PI结构。可溶性CD14主要存在于正常人和动物的血浆(清)中,由细胞膜上的膜结合型CD14脱落或细胞分泌产生,人血清中的正常浓度为2~5mg/ml,占血中全部CD14含量的99%。在感染性和非感染性疾病中,可溶性CD14的水平会发生变化,如败血症、多发性外伤、严重烧伤等患者血浆中会显著升高。可溶性CD14也可以作为某些疾病的生物标志物,如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等患者的血浆中可溶性CD14水平会明显升高。
现阶段对于CD14的应用主要集中在炎症和感染研究,免疫治疗开发,药物筛选,细胞治疗研究等方面。
炎症和感染研究:由于CD14细胞在炎症反应和病原体识别中的关键作用,它们被广泛用于研究感染性疾病和炎症反应的机制。
免疫治疗开发:CD14细胞可以用于开发基于巨噬细胞或树突状细胞的免疫治疗策略,如癌症疫苗或免疫调节剂。
药物筛选:CD14细胞是药物筛选和测试的理想工具,尤其是在抗炎药物和免疫调节剂的开发中,用于评估药物的效果和安全性。
细胞治疗研究:CD14细胞可以在体外分化为抗原呈递细胞,作为细胞治疗中的一种细胞来源,广泛应用于个性化免疫疗法中。
CD14免疫磁珠细胞分选
阳性免疫磁珠分选使用CD14+抗体从异质细胞群中结合/分离单核细胞。相反,阴性选择用针对非单核细胞的抗体或配体标记不需要的细胞类型,去除CD14-单核细胞。
阳选和阴选免疫磁珠分选 CD14+单核细胞的比较。
要分离出高活性、高纯度的CD14细胞,这对后续的应用和研究非常重要。在这方面,有柱式磁珠分选是一种高效的方法,它能够有效地提取出高纯度和高活率的CD14细胞。
CD14+纳米级磁珠细胞分选法
用CD14直标纳米磁珠对CD14+细胞进行孵育标记。然后将细胞悬液加到放置在ibeads®分离器磁场中的ibeads®柱子上。磁性标记的CD14+细胞被保留在柱子上,未标记的细胞流出柱子到下清液中。将柱子从磁场中移开后,保留在柱子上磁性标记的CD14+细胞作为阳性选择的细胞可以用缓冲液洗脱下来。
注:本图以Human CD14为示意图,不代表实际应用参考数据。具体数据用法请参照实际使用产品说明书。
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